Macbeth n’est pas satisfait : il rumine la prédiction concernant Banquo et sa descendance. Quelques paroles échangées avec sa femme suffisent à la décision d’un nouveau meurtre, celui de Banquo, qui soupçonne la vérité, et de ses fils. Perchè mi sfuggi  

Lady Macbeth ne s’en horrifie pas et laisse éclater sa joie, une fois seule, d’être enfin reine La luce langue. Elle ne reculera devant aucun crime pour parvenir à ses fins.

Dans un bois, Banquo est avec son fils Fléance et lui confie ses craintes face à l’avenir Come dal ciel. Le soir même, un groupe de sicaires à la solde de Macbeth poignarde Banquo mais laisse échapper Fléance, son fils.

Une salle de banquet du palais de Macbeth.

Une réception est donnée et les convives sont joyeux. Lady Macbeth met tout le monde de bonne humeur

Si colmi il calice . Alors qu'elle entame un toast festif, Macbeth est pris d’hallucination : le spectre sanglant de Banquo se dresse devant lui.   Di voi chi ciò fece ?.

Lady Macbeth tente de maquiller la panique du roi en malaise passager. Cependant les exclamations décousues mais lourdes de sens de Macbeth entraînent un sentiment général d’inquiétude. Lorsque cela lui arrive une seconde fois Va, spirto d'abisso !..., les invités se posent des questions et deviennent soupçonneux envers lui Biechi arcani !..

Macduff, d’ailleurs, décide de quitter une contrée qu’il juge désormais maudite.